全国免费服务热线:400-882-1638

本公司产品仅供体外研究使用,不用于临床诊断 !

实验指南

EXPERIMENT GUIDE
    联系我们 CONTACT US
    • 400-882-1638
    • biofavor@163.com
    • 湖北省武汉市高新大道858号生物医药产业园三期C4栋
    当前位置:首页 > 实验指南
    Northern杂交检测样本收集注意事项

    1.    新鲜组织:

          用解剖刀等迅速切成小碎块,约30-100 mg,放入2.0 mL离心管中,开盖液氮速冻15 min,-80℃保存,干冰运输。

    每个northern blot泳道提供2-3管样品。

    注:解剖刀处理组织的时间尽量控制在1 min以内。

          液氮速冻时必须开盖,以防炸裂。

       

    2.    细胞样品:

          悬浮细胞1000-1500 rpm,5 min,常温离心收集细胞。贴壁细胞用胰蛋白酶消化后,吹打收集,PBS洗涤细胞,去除多余培养基和胰蛋白酶。开盖液氮速冻15 min,-80℃保存,干冰运输。

          一般情况下,细胞培养的6孔板,每孔细胞数量约为0.5~2×106个。每个离心管中的细胞数量控制在5×106个左右!每个northern blot泳道提供2-3管样品。

     

    3.    RNA样品:

            RNA溶液(DEPC-treated water溶解):-80℃保存,干冰运输。

            RNA沉淀:保存在75%乙醇(无核酶)中的RNA沉淀,2~8℃保存一周,-20℃保存一年;加冰块低温运输。

    质量检测:

            取1-2 μL的RNA进行琼脂糖凝胶电泳,5s,18s,28s清晰可见,28s的亮度应为18s的1.5~2倍;无基因组污染。

    纯度、浓度检测:

    OD260/280=1.9~2.2;浓度≥300 ng/μL


    4.    注意事项:

            请严格按照样品提供原则准备样品,由于未按照要求提供样品,而造成的实验结果不理想,我公司不承担相应责任,请知悉。

            我们不接受有致病性的样品,请知悉。

    © 2009-2021武汉巴菲尔生物技术服务有限公司 版权所有,并保留所有权利。鄂ICP备10017998号

    QQ交谈