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Southern杂交检测样本收集注意事项

实验指南

EXPERIMENT GUIDE
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    Southern杂交检测样本收集注意事项
    Southern杂交检测样本收集注意事项
    southern 杂交是一个有技术含量的实验,别输在起跑跑线-----样本收集。这些收集要求你严格操作了吗?

    1.    新鲜组织:

    用解剖刀等迅速切成小碎块,约30-100 mg,放入2.0 mL离心管中,开盖液氮速冻15 min-80℃保存,干冰运输。

    每个southern blot泳道提供2-3管样品。

            注:(1) 解剖刀处理组织的时间尽量控制在1 min以内。

                   (2) 液氮速冻时必须开盖,以防炸裂。

                   (3) 对于较难提取的植物组织,如苎麻、榨菜、枣子 、鱼、甘蔗、大署等,1-2 g样品用铝箔纸包好,液氮速冻15 min-80℃保存,干冰运输。


    2.    细胞样品:

    悬浮细胞 1000-1500 rpm5 min,常温离心收集细胞。贴壁细胞用胰蛋白酶消化后,吹打收集,PBS洗涤细胞,去除多余培养基和胰蛋白酶。开盖液氮速冻15 min -80℃保存,干冰运输。

    一般情况下,细胞培养的6孔板,每孔细胞数量约为0.5~2×106个。每个离心管中的细胞数量控制在5×106个左右!每个southern blot泳道提供2-3管样品。


    3. DNA样品(双蒸水水溶解):

            2-8℃短期保存,-20℃长期保存;加冰块低温运输。

    质量检测

    1-2 μLDNA进行琼脂糖凝胶电泳,无蛋白质和RNA等物质污染,无降解弥散,条带清晰。

    纯度、浓度检测

    OD260/280=1.8~2.0OD260/2802.0;浓度≥100 ng/μL


    4. 注意事项:

    请严格按照样品提供原则准备样品,由于未按照要求提供样品,而造成的实验结果不理想,我公司不承担相应责任,请知悉。

    我们不接受有致病性的样品,请知悉。

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