特色项目
SPECIAL PROJECTS
技术优势
快速准确的找到与某种表型相关的基因全基因组水平筛选，利于发现新靶点假阳性率较低，靶点命中率高应用范围广
背景介绍CRISPR/Cas9可谓是当今基因编辑领域最热门的明星工具，2014年张锋教授结合CRISPR 技术和二代测序技术，开发了针对人类全基因组的CRISPR 敲除文库，并在肿瘤细胞系上利用该文库进行了抗药基因的筛选。在获得阳性基因的基础上，获得了新的抗性基因，相关研究发表在Science杂志上。同年，多篇CNS(Cell、Nature、Science)连续报道基于CRISPR/Cas9文库的高通量筛选技术的应用。利用该技术，研究人员在药物靶标发现、基因功能研究、药物敏感基因研究、病毒宿主研究等领域取得了巨大的成功。
实验原理利用CRISPR/Cas9技术建立哺乳动物全基因组突变库或者与某类功能相关的基因突变体库，通过功能性筛选和富集以及随后的PCR扩增和深度测序分析，发掘与筛选表型相关的基因，称为CRISPR/Cas9文库筛选。
巴菲尔服务项目巴菲尔生物现有标准化的GeCKO v2 human library和SAM human library两种全基因组文库，可以为客户提供全基因组范围内的大规模筛选服务。此外，巴菲尔生物还可根据客户课题特定的信号通路定制需求，进行个性化sgRNA定制，为客户提供多样化的CRISPR/Cas9文库筛选服务。
| GeCKO V2.0 Human library | SAM Human library | |
| 物种 | Human | Human |
| 类型 | 敲除文库 | 激活文库 |
| 覆盖基因数目 | 19,052 Genes+1,864 miRNAs | 23,430条转录本 |
| SgRNA数目 | 6 per gene+4 per miRNA | 3 per转录本 |
实验流程合成sgRNA混合文库、构建质粒混合文库、制备sgRNA慢病毒文库、构建文库稳转细胞株、表型筛选、sgRNA片段的PCR扩增、NGS测序及分析
案例展示利用GeCKO人类全基因组敲除文库筛选发现某药物Hela细胞毒性关键基因的技术路线图
服务咨询巴菲尔生物现推出CRISPR/Cas9文库筛选一站式服务，并通过解读深度测序结果，最终为客户提供目标基因名称。目前还有促销活动正在进行中，凡在我公司定制人类全基因组CRISPR-Cas9文库筛选服务的客户均可免费使用我公司的人类全基因组gRNA敲除/激活文库。
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