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特色项目

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背景介绍

武汉巴菲尔生物技术服务有限公司在10年的发展历程中,依托完备的实验硬件设施和技术体系,我们的技术人员积累了丰富的实验操作经验,处理过非常多且复杂的各项技术服务,能为您提供专业的实验设计服务和解决方案。巴菲尔放眼于全球生物医药前言技术转化应用开发,立足于全国生物医药研发检测合作及项目孵化,成果转化。我们紧抓热点,为广大的科研工作者提供更多的优质服务,同时发展自己的特色项目:CRISPR/Cas9文库筛选服务多光谱成像技术动物行为实验

CRISPR/Cas9文库筛选服务

CRISPR/Cas9系统自从2011年被张锋实验室等进行改进和应用后,迅速在基因编辑领域占据了绝对的主导地位。2014 年,张锋教授利用CRISPR 技术和二代测序,开发了针对人类全基因组的CRISPR 敲除文库,并在肿瘤细胞系上利用该文库进行了抗药基因的筛选。在获得阳性基因的基础上,获得了新的抗性基因,并且将相关研究发表在Science杂志上。

目前多篇CNS(Cell、Nature、Science)连续报道基于CRISPR/Cas9文库的高通量筛选技术的应用,在NCBI上关于genome-scale CRISPR的文章现在已经有超过120 篇,并且主要集中于Nature、Science、Cell、PNSA等高分杂志及其主要子刊。利用该技术,研究人员在药物靶标发现、基因功能研究、药物敏感基因研究、病毒宿主研究等领域取得了巨大的成功。

巴菲尔生物紧跟科研前沿,已引进人类全基因组敲除文库和人类全基因组激活文库,并推出文库慢病毒包装、稳转细胞株筛选、表型筛选、深度测序、生信分析等一系列服务,能帮您完成全部的文库筛选相关实验,分析获得关键基因。

技术优势

技术优势

快速准确的找到与某种表型相关的基因

全基因组水平筛选,利于发现新靶点

假阳性率较低,靶点命中率高

应用范围广

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多光谱成像技术

多光谱成像技术,可俗称免疫荧光多标,即将我们常见的免疫荧光双标提高到六标,实现了在同一张组织切片上同时标记3~6种蛋白,解决了科研中经常遇到的标记蛋白种类太少,无法在同一张切片上观察不同细胞或者多种蛋白分布情况的难题。那么多光谱成像技术是什么工作原理,同时又具有哪些更加强大的功能?

多光谱成像技术由多标染色、图像采集和图像分析三大模块组成。多标染色采用的是Opal/TSA多标记免疫荧光技术,打破了常规免疫荧光技术的局限性,不受一抗的种属来源限制,能够在同一组织切片样本上复染多达7种荧光标记(含DAPI在内)。图像采集采用了Vectra全光谱图像采集技术,这是最新一代的组织切片成像分析系统,创新性的将光谱成像和切片全景扫描功能完美融合,实现了革命性的技术跨越,通过光谱拆分能够去除自发荧光的干扰,有效识别多重荧光信号,从而获得高品质图像,确保能够进行精准的定量定位分析。

图像分析方面,我们采用的是inForm自动图像分析软件,该软件具有自学习功能,实现准确的智能组织划分,而且输出参数信息非常丰富,例如目标数目、位置、光谱拆分信号水平等。如果目标是细胞,输出参数可以是单细胞多蛋白表达结果,与流式细胞仪所做分析类似。该软件还可对染色区域面积进行计算分析,计算特定区域或者不同结构内的的阳性细胞数目、进行定量病理评分等。

传统免疫荧光Opal/TSA多标记免疫荧光
靶点数目一般标记3种(含DAPI)最多可同时染色7种
一抗种类不同抗体必须是不同的种属来源不受一抗来源限制,即不同抗体均来源于同一种属(如兔抗)也可进行实验
二抗种类荧光探针标记的二抗辣根过氧化物酶标记的二抗,不直接连接荧光标记
染色策略样本抗原的空间位置的差异,需要设计复杂的染色策略。样本/靶点的差异导致染色策略的差异,染色过程复杂、多变任何样本无需任何染色策略,简单的重复前一步的染色过程,样本/靶点的差异不影响染色过程,使用简单方便
染色效果亮度较弱,容易淬灭,各种抗体间存在互相影响,背景较高,对基于单细胞的定量分析不利高染色分辨率和染色特异性,信号强度强,淬灭时间更长,无背景影响,各靶点的信噪比大大提高,尤其适合组织基于单细胞的定量分析
技术优势

技术优势

同一张组织切片上实现多达7种染色

增强抗体灵敏度达1000倍,节约抗体

摆脱一抗种属来源束缚,实现抗体自由选择

组织原位类流式分析

单一细胞多重表达标记实现组织原位观察

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动物行为实验

动物行为的变化是基因与环境两者相互作用产生的结果。基因发生改变(如转基因,基因敲除或基因的上调下调等)最终表现为与基因相关的行为变化;环境发生改变(如声、光、电的刺激和药物的处理)不仅可直接影响动物的行为,而且可通过对特定基因的影响进一步间接改变动物的行为。

动物行为学实验是神经科学研究领域的重要组成部分,主要侧重于科学客观地评价各种条件下的动物行为,如学习记忆、运动能力、焦虑机制、药后反应。动物行为学实验的发展日新月异,新的试验方法层出不穷,特定的实验需要特定的仪器分析,为了更好的服务于广大科研用户,我公司特引进了专业行为学实验仪器,包括morris水迷宫、旷场、Y迷宫等,可以满足多种疾病模型研究需求。

器官移植类动物模型

器官移植是治疗终末期器官功能衰竭的最有效的手段。中国器官移植发展报告(2019)显示,2015年1月1日至2019年12月31日,中国公民逝世后器官捐献累计完成24112例。2019年中国公民逝世后器官捐献5818例,器官移植手术19454例。每百万人口中器官捐献率从2015年的2.01上升至2019年的4.16。

器官移植的目标是达到受者对移植物的特异性耐受状态而不需用免疫抑制剂。啮齿类动物模型的生理特征及免疫系统与人相似,用其建立器官移植模型,是将诱导耐受策略应用于临床的必要步骤。运用大小鼠动物模型进行器官移植术, 为筛选抗排斥药物、免疫抑制剂提供了便利条件。巴菲尔生物拥有SPF级动物实验平台,能为广大科研用户提供器官移植类动物模型,以及动物实验技术外包服务。

肿瘤细胞干性诱导实验

近日,世界卫生组织国际癌症研究机构(IARC)发布了2020全球癌症负担数据:2020年,全球癌症新发1929万例,癌症死亡996万例。随着对肿瘤研究的深入,越来越多的癌变机制和干预策略被发现,肿瘤干细胞理论很好地解释了肿瘤的起始、转移、耐药和复发,也与越来越多的临床现象和实验数据相符合。因此,对肿瘤干细胞的深入理解有重大的科学和临床意义。

然而,肿瘤干细胞的获取十分困难,目前的分离方法主要分为“流式分选法”、“3D培养法”、“无血清神经干细胞培养基培养法”。其中“流式分选法”依据肿瘤干细胞表面标志物进行筛选,虽然准确、快捷,但是经济成本极高;“3D培养法”使培养基环境更接近人体内环境,模拟性最好,但是实际操作难度较大,成功率较低,且不便纯化;“无血清神经干细胞培养基培养法”操作简单、经济成本低,但是时间成本很高、实际操作中适用范围有限。

因此,巴菲尔生物在“无血清神经干细胞培养基培养法”的基础上做了改进,保留了其操作简单、经济成本低的优点,同时极大缩短了实验周期,拓展了该方法的适用范围,在传统方法失败的细胞株也中获得成功。

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